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微生物菌種保存辦法和活化次序操作⑴液氮超低溫冷凍法類似于-80℃冰箱冷凍法。安瓿管或塑料冷凍管從醫(yī)用冰箱中取出,馬上置于38℃-40℃水溫活化并適當搖晃大約50秒到100秒,直到內部的冰完全溶化后打開塑料冷凍管和安瓿管,內容物轉移到合適的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。
⑵常規(guī)定期移植法的菌種活化非常容易,直接移植即可;
⑶活化保存在液體石蠟中的菌種時,選擇少量菌種并將它們轉移到合適的新鮮培養(yǎng)基中,生長繁殖后再轉接。
⑷沙土管法保存菌種活化時,應在無菌環(huán)境下打開沙土管,取一些沙子放在合適的斜面培養(yǎng)基上,待*繁殖生長后再轉接,把沙子和土壤顆粒放在合適的中.海液體培養(yǎng)基中,增殖培養(yǎng)后轉接到斜面上。
⑸真空冷凍干燥法保存菌種活化時,先用70%酒精棉擦拭安瓿上部,加熱安瓿管頂部,將無菌棉簽浸入冷水中,擦拭一圈頂部,頂部出現(xiàn)裂紋,敲擊用刀或鑷子夾住頸部,敲掉破裂的安瓿管頂部,用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌種,用無菌吸管轉移到新鮮培養(yǎng)基中進行中溫培養(yǎng);
根據(jù)以上微生物菌種保存辦法,微生物菌種從保存狀態(tài)活化四個次序操作:
①制備適合菌株生長的培養(yǎng)基。
②將菌株從保存狀態(tài)恢復到室溫狀態(tài),如解凍冷凍菌株。
③將保存好的菌種通過操作接種到培養(yǎng)基中,此步驟稱為菌種復壯。
④選擇培養(yǎng)基上復壯的菌落,篩選部分菌落接種新的培養(yǎng)基,重復此步驟兩叁次,即可長出更好的菌落。 |