一、夾心法根據(jù)操作步驟又分為一步法、兩步法、三步法，三者之間的區(qū)別歸納如下：

二、ELISA競爭法和夾心法的區(qū)別：

競爭法（competitive ELISA）：

小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定，可以采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的酶標抗原愈少，的顯色也愈淺。

優(yōu)點：適用于小分子抗原，數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。

缺點：整體的敏感性和特異性都較差。

夾心法（sandwich ELISA）：

被檢測的抗原包被在兩個抗體之間，其中一個抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體，此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量；或不標記，再透過酶標記的二抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應(yīng)或競爭相同的抗原結(jié)合部位。

優(yōu)點：高靈敏、高特異性，抗原無須事先純化。

缺點：抗原一定得擁有兩個以上的抗體結(jié)合部位。

 競爭法和夾心法的相同點：兩種方法都是檢測抗原物質(zhì)。

  不同點：競爭法是用于檢測小分子抗原物質(zhì)，只有一個反應(yīng)位點，沒法用夾心法方法檢測。而大分子抗原更適用于夾心法（也可以用競爭法），因為夾心法實驗結(jié)果特異性和靈敏度更好。

注意：不同物質(zhì)的適用原理可能不同，所以并沒有說競爭法的一定比夾心法做的結(jié)果好，同樣夾心法的也不一定比競爭法的結(jié)果好。我根據(jù)不同項目用方法的盒子。

三：即用型標準品（稀釋好的液體標準品）和高濃度單試劑標準品（粉劑標準品）的優(yōu)劣勢

即用型：

優(yōu)勢：使用更加方便，拆開即用不需要再另外稀釋，使用線性會更好

劣勢：保存時間比較短，穩(wěn)定性容易受保存條件和時間的影響

粉劑標準品： 

優(yōu)勢：保存時間更長，試劑穩(wěn)定性更好，可根據(jù)需求配置自己的需要的標準濃度

劣勢：需要自己稀釋線性濃度，操作比較麻煩，稀釋線性容易出現(xiàn)問題

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