秋冬春季是禽流感的高發(fā)季節(jié)，定期監(jiān)測(cè)家禽的禽流感抗體滴度，了解禽群免疫狀態(tài)尤為必要，即使懷疑禽群發(fā)生禽流感感染也不要慌張，了解禽流感的送檢和診斷操作流程，往往事半功倍。通過(guò)檢測(cè)禽群的疫病情況與否并加以分析，總結(jié)案例，才能收獲養(yǎng)殖經(jīng)驗(yàn)。

1、具備什么條件才能采集病料做病原分離？

高致病性禽流感屬于一類傳染病，為了防止疾病蔓延擴(kuò)散，其病原分離必須在農(nóng)業(yè)部指定的專業(yè)實(shí)驗(yàn)室、具備BSL3條件的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。在不具備嚴(yán)格防護(hù)條件的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒分離增殖，容易引起散毒以及有可能造成實(shí)驗(yàn)人員的感染。

2、發(fā)生禽流感后如何采集分離病原的樣品？

診斷很大程度上依賴于樣品的質(zhì)量、樣品在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室處理前的儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程的情況。用于細(xì)胞培養(yǎng)、雞胚接種、直接檢測(cè)病毒抗原或核酸的呼吸道病毒的樣品，應(yīng)在流感癥狀出現(xiàn)的開(kāi)始3天進(jìn)行采集。禽流感主要由呼吸道和消化道感染。因此，哺乳動(dòng)物及禽類上呼吸道采集的樣品適合用于流感病毒的鑒定和診斷。上呼吸道拭子分為三種：鼻棉拭子、喉棉拭子和氣管棉拭子。已屠宰或已死亡的哺乳動(dòng)物應(yīng)在下呼吸道采集樣品，樣品分為氣管棉拭子、支氣管棉拭子、肺組織等三種。禽類樣品采集的部位應(yīng)集中在呼吸道和大部分的消化道，采集的病毒樣品種類包括泄殖腔棉拭子和糞便，其中泄殖腔棉拭子可從活體雞或剖殺的雞群中采集，從雞舍或環(huán)境中采集糞便樣品是常用的采樣方法，但其具有不能確定樣品的準(zhǔn)確來(lái)源的缺點(diǎn)，如果懷疑死禽體內(nèi)含有高致病力的禽流感病毒，還應(yīng)采集有代表性的內(nèi)臟器官如腦、脾臟、心臟、肺臟、胰腺、肝臟和腎臟以及呼吸道、消化道等部位的標(biāo)本。標(biāo)本樣品應(yīng)添加*以防止*的生長(zhǎng)。

3、如何采集和運(yùn)送病理樣品？

病理樣品一般應(yīng)在感染初期或發(fā)病急性期從死禽或活禽采取。死禽采集氣管、肺臟、肝臟、腎臟、脾臟、泄殖腔等組織樣品。活禽用大小不等的滅菌棉拭子涂擦喉頭、氣管或泄殖腔，帶有分泌物的棉拭子放入每毫升含有1000國(guó)際單位青霉素、2000微克鏈霉素、pH7.2~7.6的肉湯中，無(wú)肉湯時(shí)可用Hank，s液或25%~50%的甘油生理鹽水。糞便和泄殖腔棉拭子所用*濃度應(yīng)提高。

樣品的運(yùn)送和保存：采集的樣品若在48小時(shí)內(nèi)進(jìn)行檢查，可放入4℃保存；否則應(yīng)放于低溫條件下保存。

4、高致病性禽流感診斷方法和程序是什么？

（1）流行病學(xué)禽流感病毒的宿主廣泛，雞、火雞、鴨、鵝、鵪鶉和雉雞等家禽及野鳥(niǎo)、水禽、海鳥(niǎo)等均可感染。其中以雞和火雞感染禽流感病毒后的危害最為嚴(yán)重，而在鴨中分離到的病毒比其他禽類多。各種日齡的禽均可感染。禽流感病毒主要通過(guò)患禽間（包括與患禽接觸的器具）的直接接觸和間接接觸傳染。此外，帶毒的飛鳥(niǎo)或水禽常常成為傳染源，引起家禽大批地發(fā)病和死亡。

（2）臨床癥狀禽流感的潛伏期從幾小時(shí)到3天不等，潛伏期的長(zhǎng)短依賴于感染病毒的毒力和劑量、感染途徑、被感染禽的種別和禽體的狀態(tài)。急性感染的禽流感無(wú)特定臨床癥狀，在短時(shí)間內(nèi)可見(jiàn)食欲廢絕，體溫驟升，呼吸道癥狀，下痢，后期出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。伴隨大量死亡。

（3）病理變化禽流感的病理變化因感染毒株毒力的強(qiáng)弱、病程長(zhǎng)短和禽種的不同而變化不一。主要表現(xiàn)為頭腫，肉髯、冠出血，小腿和趾部皮下出血、水腫，腺胃乳頭出血及輸卵管炎等。

（4）病原學(xué)診斷 病毒分離需由國(guó)家規(guī)定實(shí)驗(yàn)室完成。

（5）血清學(xué)診斷目前用于禽流感檢測(cè)的方法有禽流感病毒分離技術(shù)、瓊脂擴(kuò)散（AGP）試驗(yàn)、血凝抑制（HI）試驗(yàn)、神經(jīng)氨酸酶抑制（NI）試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、病毒中和試驗(yàn)（SN）、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）、免疫熒光技術(shù)（IF）及核酸探針技術(shù)。

總之，對(duì)禽流感的診斷，實(shí)驗(yàn)室病毒的分離、鑒定，以及致病性試驗(yàn)都耗時(shí)較長(zhǎng)，花費(fèi)也較高，只有極少數(shù)的實(shí)驗(yàn)室能進(jìn)行此項(xiàng)檢查，在收到檢查樣品后不能在較短時(shí)間（48小時(shí)）內(nèi)做出確診，確診滯后于現(xiàn)場(chǎng)采取措施的要求。禽流感這類疫病的確診越快、越早，損失就越小。

5、病原的確認(rèn)工作大概需要多長(zhǎng)時(shí)間？做什么實(shí)驗(yàn)？

高致病性禽流感必須通過(guò)病毒的分離、鑒定來(lái)確診。病毒的分離及亞型鑒定一般至少需要3~5天。病毒的致病性必須通過(guò)人工靜脈接種無(wú)特定病原雞（SPF雞）來(lái)最后確定。

6、禽流感疫苗免疫后雞群禽流感抗體需要定期監(jiān)測(cè)么？

禽流感疫苗免疫機(jī)體后需要定期的監(jiān)測(cè)禽流感抗體滴度變化，避免免疫空白期的產(chǎn)生，監(jiān)測(cè)雞群抗體滴度及雞群個(gè)體間抗體整齊度，若雞群抗體整齊度高，則說(shuō)明雞群的免疫狀態(tài)良好。一般來(lái)說(shuō)，蛋雞或種雞開(kāi)產(chǎn)前至少免疫三次，開(kāi)產(chǎn)后每三個(gè)月左右免疫一次，或者根據(jù)抗體監(jiān)測(cè)變化，確定*的免疫時(shí)機(jī)，讓免疫接種發(fā)揮*效果。